附录B                  ;        

(规范性附录)培养基的灭菌及准备

B．1 大豆酪蛋白琼脂培养基（TSA）培养基的灭菌及准备

B．1.1 培养基采用大豆酪蛋白琼脂培养基，可以按以下处方制备，也可使用按该处方生产的符合要求的脱水培养基。配制后按培养基规定的经验证合格的灭菌程序灭菌。

B．1.2 大豆酪蛋白琼脂培养基配方

酪蛋白y酶消化物……………………………………………………  15g

大豆粉木瓜蛋白酶消化物……………………………………………   5g

氯化钠…………………………………………………………………   5g

琼脂……………………………………………………………………  15g

纯化水……………………………………………………………… 1000mL

取上述成分除琼脂，混合，微热溶解，调节pH值使灭菌后为7.3±0.2，加入琼脂，加热融化后，分装，灭菌，冷却至约60℃，在无菌操作要求下倾注约20mL至无菌平皿（φ 90mm1） ）中。加盖后在室温放至凝固。  

B．2  沙氏琼脂培养基（SDA）培养基的灭菌及准备

葡萄糖………………………………………………………………  40g

酪蛋白胰m消化物、动物组织的胃酶消化物等量混合…………  10g

琼  脂………………………………… ……………………………  15g

      纯化水…………………………………………………………… 1000Ml

取上述成分除琼脂，混合，微热溶解，调节pH值使灭菌后为5.6±0.2，加入琼脂，加热融化后，分装，灭菌，冷却至约60℃，在无菌操作要求下倾注约20mL至无菌平皿（φ 90mm） 中。加盖后在室温放至凝固。

B．3  培养基平皿培养及保存  

制备好的培养基平皿宜在2℃~8℃保存，一般以一周为宜或按厂商提供的标准执行。采用适宜方法在平皿上做好培养基的名称、制备日期记录的标记。